ELISA檢測試劑盒-大鼠 小鼠等ELISA檢測試劑盒

在世界范圍內用于治療多種廣泛的x癥。它們以各自的商標名作為藥品銷售：Avastin®，Erbitux®和Herceptin®。這項研究的目的是開發(fā)內部特異性酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA），以評估這三種單克隆抗體的長期穩(wěn)定性。這些測定法通過量化單克隆抗體的生物學活性來評估其生物學功能。為此，我們開發(fā)了一種間接ELISA程序，將針對mAb的特異性抗原用作ELISA板上的特異性“捕獲”抗體。因此，我們在BVZ的ELISA中使用了血管內皮生長因子（VEGF）； CTX ELISA中的人類表皮生長因子受體（hEGFR）和TTZ ELISA中的人類受體HER2（hHER2）。在單克隆抗體附著其抗原后，我們使用抗人IgG（整個分子）過氧化物酶結合物和鄰苯二胺二鹽酸鹽底物。用硫酸終止反應，并在450nm的波長處記錄吸光度。三種ELISA方法在校準模型，測定范圍，檢測和定量限，日內和日間精度和準確性以及交叉反應的特異性方面得到了驗證。還對藥物進行了強制降解研究，提供了有用的信息。最終，擬議的ELISA成功地用于長期穩(wěn)定性研究中，以量化已打開并隨后在兩種不同的存儲條件下（即在4°C下冷藏并在-20°C下冷凍）的藥物的剩余生物活性。結果表明，就其生物學功能而言，BVZ（Avastin®）是這三種中最穩(wěn)定的。

Tau病理學與阿爾茨海默氏?。ˋD）進展之間的密切相關性使該蛋白成為診斷和監(jiān)測疾病進展的合適生物標志物。但是，由于目前需要收集腦脊液（CSF），這是一種侵入性臨床程序，因此Tau在診斷中的使用受到了阻礙。盡管測量血漿中的Tau水平會比較有利，但其濃度低于常規(guī)ELISA的檢測極限。在這項工作中，我們開發(fā)了一種數(shù)字ELISA，用于定量緩沖液和生物樣品中阿托莫拉蛋白Tau的濃度。首先使用內部開發(fā)的抗體將單個Tau分子捕獲在磁性粒子的表面，然后分離到2×2×mm2微孔陣列的飛升大小的孔中。高親和力抗體，最佳測定條件和數(shù)字量化方法的結合導致緩沖液樣品的檢測限（LOD）為24±±7 aM。此外，通過將數(shù)字讀數(shù)與模擬方法相結合，可以實現(xiàn)6個數(shù)量級的動態(tài)范圍，從而可以使用同一平臺對Tau的摩爾濃度至皮摩爾濃度進行定量。這證明了本發(fā)明的測定方法與不同生物樣品中遇到的各種Tau濃度的兼容性。接下來，將開發(fā)的數(shù)字化驗用于檢測加標血漿中的總Tau水平。與緩沖液樣品相比，獲得了相似的LOD（55±±29 aM），其靈敏度是市售ELISA的5000倍，甚至比以前報道的數(shù)字化檢測的靈敏度提高了10倍。最后，通過定量三個臨床CSF樣品中的蛋白質Tau來評估開發(fā)的數(shù)字ELISA的性能。在此，在測量的活性顆粒百分比與參考蛋白Tau值之間發(fā)現(xiàn)高度相關性（即，皮爾森系數(shù)為0.99）。提出的數(shù)字ELISA技術具有很大的潛力，可以挖掘Tau作為早期AD診斷的生物標志物的潛力。