細(xì)胞名稱HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)
種屬人
年齡(性別)
組織來源B淋巴母細(xì)胞
生長特性懸浮
細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣
背景描述HMy2.CIR細(xì)胞是ARH-77細(xì)胞株的快速生長突變株Hmy.2B經(jīng)γ射線照射,選擇HLAI型抗原表達(dá)缺失的細(xì)胞而得到的細(xì)胞株。HMy2.CIR細(xì)胞不表達(dá)HLAA位點(diǎn)和B位點(diǎn)的產(chǎn)物,但表達(dá)少量HLACw4。HMy2.CIR細(xì)胞適于用作I型主要組織相容性抗原基因的轉(zhuǎn)染宿主。有報(bào)道稱,ARH-77細(xì)胞呈EB核抗原陽性(EBNA+)和EB病毒莢膜抗原陽性(EBVCA+)。由于Hmy2.CIR細(xì)胞起源于ARH-77細(xì)胞株的快速生長突變株Hmy.2B,推測(cè)HMy2.CIR細(xì)胞也是EBNA+。
生長培養(yǎng)基IMDM+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
運(yùn)輸和保存
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
?。?)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第1次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。