①新鮮恒冷箱冷凍切片，厚6~8μm，平貼在蓋玻片上。②滴染法：將有冷凍切片的蓋玻片（標(biāo)本面朝上）平放于預(yù)熱好的培養(yǎng)皿中（底部墊一濕濾紙），滴加孵育液至全部覆蓋組織，于37℃溫箱中孵育45~60分鐘（肝，心肌組織15分鐘即可）。③于生理鹽水中沖洗二次（輕晃，以防脫片）。④10%福爾馬林生理鹽水固定10分鐘。⑤15%酒精浸洗5分鐘（換二次）。⑥甘油明膠封片。結(jié)果：酶活性強(qiáng)處呈藍(lán)色顆粒（雙甲沉淀），酶活性較低時(shí)形成紫紅色單甲。在光鏡下，該酶活性于肝小葉內(nèi)分布呈明顯分帶現(xiàn)象，周邊帶強(qiáng)于中央帶。在心肌細(xì)胞縱切面，酶活性顆粒沿心肌細(xì)胞長軸整齊排列，相鄰心肌細(xì)胞的空白處為閏盤。固定具有凝固或沉淀組織蛋白的作用，因此能抑制酵解酶類的活動(dòng)和細(xì)菌的繁殖，從而呈現(xiàn)對(duì)組織的固定作用（1）10%福爾馬林液：1份甲醛液+9份蒸餾水市場上出售的甲醛液約含37-40%的甲醛，10%福爾馬林液實(shí)際上僅含3.7-4.0%的甲醛適用范圍：各種組織。但是經(jīng)10%福爾馬林液固定的組織，細(xì)胞核染色較好，而細(xì)胞質(zhì)染色較差處理：組織塊一般固定24h以上，長時(shí)間亦可，甚至可用來長期保存組織塊。短時(shí)間固定的組織塊不需水洗，可直接轉(zhuǎn)入70%酒精脫水（2）Bouin氏液：苦味酸飽和水溶液（1.22%）75ml甲醛液25ml冰醋酸5ml適用范圍：各種動(dòng)物組織及植物組織的根尖，是動(dòng)物組織良好的固定液處理：固定24h，也可在此液長期保存。流水沖洗或不經(jīng)水洗直接入70%酒精脫水。二組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)染色法組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)，是將物理和化學(xué)的技術(shù)運(yùn)用到組織標(biāo)本，用顯微鏡和化學(xué)分析方法來研究組織和細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分，并觀察該化學(xué)成分在組織、細(xì)胞內(nèi)的定位、含量及其變化規(guī)律。這些化學(xué)成分借著化學(xué)反應(yīng)所產(chǎn)生的不溶性著色物質(zhì)來顯示。對(duì)于某些化學(xué)成分，例如：Fe++糖原、核酸等，可以用直接或間接的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生著色沉淀而顯示其部位和相對(duì)含量。對(duì)于酶類，顯示它的活性，須有該種酶的底物（被該種酶作用的物質(zhì)），由酶對(duì)底物的分解，直接或間接地生成著色物質(zhì)而被顯示。凡是在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞原位顯示的化學(xué)物質(zhì)，稱組織化學(xué)，若用電鏡觀察細(xì)胞原位化學(xué)成分的著色部位，則稱電鏡細(xì)胞化學(xué)，